艾狄斯?骨堿性磷酸酶檢測(cè)試劑盒（酶聯(lián)免疫法）產(chǎn)品說(shuō)明:

【產(chǎn)品簡(jiǎn)介】

艾狄斯?骨堿性磷酸酶檢測(cè)試劑盒用于定量測(cè)定人血清中成骨細(xì)胞活性指示劑骨特異性堿性磷酸酶的特異性酶免測(cè)定方法。BAP也被稱為骨ALP，主要用于檢測(cè)兒童佝僂病、絕經(jīng)后婦女骨質(zhì)疏松癥和變形性骨炎，同時(shí)已在臨床上證明對(duì)骨代謝疾病的治療能進(jìn)行有效的監(jiān)測(cè)和評(píng)估。僅用于體外診斷。僅供科研使用。

骨轉(zhuǎn)化是一個(gè)骨吸收和骨形成持續(xù)進(jìn)行的動(dòng)態(tài)過(guò)程。骨吸收是由破骨細(xì)胞消融骨和膠原蛋白I而產(chǎn)生的，而骨形成是由成骨細(xì)胞形成新骨而產(chǎn)生的。正常情況下，這個(gè)過(guò)程是維持動(dòng)態(tài)平衡的，或者說(shuō)是“耦聯(lián)”的。但是，隨著我們年齡的增大，或者受到身體狀態(tài)和各種疾病的影響，骨轉(zhuǎn)換可能變成“非耦聯(lián)”的，也就是骨吸收和骨形成以不同的速率進(jìn)行。非耦聯(lián)的骨轉(zhuǎn)移可能導(dǎo)致過(guò)量的骨丟失或骨形成。不管情況如何，Ostase?BAP都是骨轉(zhuǎn)換動(dòng)力學(xué)的評(píng)估指標(biāo)。Ostase?BAP為實(shí)驗(yàn)室提供了血清骨特異性堿性磷酸酶（BAP）定量的檢測(cè)方法，可精確測(cè)定骨轉(zhuǎn)換的動(dòng)態(tài)變化。

骨形成特異性指標(biāo)，來(lái)源于成骨細(xì)胞，是成骨細(xì)胞的特異性指標(biāo)。和其他形式的堿性磷酸酶有本質(zhì)區(qū)別。BAP的活性在室溫下大約為1-2天，且不受飲食和時(shí)間的影響。

血清BAP是骨折后檢測(cè)血清的靈敏和精確指標(biāo)。在骨代謝異常的各種病癥中血清BAP是個(gè)有診斷意義的指標(biāo)，如（Paget癥、癌癥骨轉(zhuǎn)移、骨營(yíng)養(yǎng)不良、骨質(zhì)疏松等癥狀）；骨質(zhì)疏松是慢性疾病，骨代謝改變異常，實(shí)驗(yàn)證明BAP在長(zhǎng)期檢測(cè)骨質(zhì)疏松中有極高意義。???

預(yù)防兒童缺乏維他命D佝僂病及監(jiān)測(cè)佝僂病的治療進(jìn)程。

【背景資料】

血清中的骨堿性磷酸酶的濃度被認(rèn)為反映了成骨細(xì)胞的代謝活性，而骨代謝的精確評(píng)價(jià)對(duì)于明確骨代謝病的嚴(yán)重程度和治療反應(yīng)有著重要意義。因此在變形性骨炎、骨軟化、原發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)、腎性骨營(yíng)養(yǎng)不良、骨質(zhì)疏松和骨轉(zhuǎn)移瘤中，血清骨堿性磷酸酶水平的檢測(cè)有著用武之地。骨堿性磷酸酶的測(cè)定就被應(yīng)用于變形性骨炎診斷和病情的檢測(cè)。

在骨代謝疾病的監(jiān)測(cè)中，生化標(biāo)志物是一個(gè)有用的指標(biāo)。尿中羥(基)脯氨酸(Hydroxyproline)水平和血清總堿性磷酸酶水平，已經(jīng)用于監(jiān)測(cè)變形性骨炎的治療效果。骨質(zhì)疏松，相對(duì)于變形性骨炎，是一種更輕微的骨重建的過(guò)程，因此需要更敏感和特異的標(biāo)志物。為此，?OCTEIA Ostase?為實(shí)驗(yàn)室提供了血清骨特異性堿性磷酸酶（BAP）定量的檢測(cè)方法，該檢測(cè)方法現(xiàn)已顯示，在用于骨代謝疾病的診治方面證明是有效的。

【臨床應(yīng)用】

1、??預(yù)測(cè)骨折風(fēng)險(xiǎn)

2、??監(jiān)測(cè)絕經(jīng)后婦女骨質(zhì)疏松癥治療療效，提升依從性

3、??監(jiān)測(cè)變形性骨炎治療療效

4、??檢測(cè)抗骨吸收治療療效

5、??促成骨治療療效監(jiān)測(cè)

6、??營(yíng)養(yǎng)性佝僂病和骨軟化癥的輔助診斷

7、??骨代謝疾病研究

【樣本采集】

采血后盡快分離血清，樣本采集時(shí)須避免溶血。須采用血清樣本（不能采用血漿），混濁血清樣本或含有顆粒物的樣本，在測(cè)定前應(yīng)進(jìn)行離心處理。

【樣本保存時(shí)間和條件】

血清樣本

室溫：8小時(shí)

2-8℃：2天

-20℃：2個(gè)月

-70℃：>36個(gè)月

【試劑盒特點(diǎn)】

1、性能穩(wěn)定可靠，歷經(jīng)多年市場(chǎng)驗(yàn)證

2、簡(jiǎn)便快速，歷經(jīng)眾多客戶驗(yàn)證

3、特異性高，僅檢測(cè)骨特異性堿性磷酸酶

4、結(jié)果不受飲食/晝夜變化影響

【參考文獻(xiàn)】

1、??Long-term biochemical response after bisphosphonate therapy in Paget’s Alvarez 2004 Rheumatology 43:869

2、??Spondylarthropathies：therapy【328-331】2004 Rheum-atology 43:129

3、??Bone Turnover in Prolonged Critical IIIness：Effect of Vitamin D Van Den Berghe 2003 J.Clin. Endocrinol.metab.88:4623

4、??Increased Bone Mineral Density in Patients with Chronic Hypoparathyroidism Chan 2003 J.Clin.Endocrinol.metab.88:3155

5、??Alendronate Prevents Loss of Bone Density Associated with Discontinuation of…Ascott-Evans 2003 Archives of Internal Medicine 163:789

6、??Osteoporosis and Vitamin-D Deficiency Among Postmenopausal Women with Osteoa…Glowachi 2003 J.Bone Joint Surg.Am.85:2371

7、??Alendronate Increase Bone Mass and Reduces Bone Markers in postmenopausal A…Bell[2002]J.Clin.Endocrinol.metab.87:2792

8、??Alendronate Improves Bone Mineral Density in Elderly Women with Osteoporosis…Greenspan 2002 Ann Intern Med136:742

更多骨代謝指標(biāo)：

抗酒石酸酸性磷酸酶5b(TRACP 5b)

抗酒石酸酸性磷酸酶（TRACP）由破骨細(xì)胞和有活力的巨噬細(xì)胞釋放。在血液循環(huán)中的TRACP有TRACP 5b 和TRACP 5a二種形式， TRACP 5b 來(lái)源于破骨細(xì)胞，而TRACP 5a來(lái)源于巨噬細(xì)胞。血清TRACP 5b水平可反映破骨細(xì)胞活性和骨吸收的狀態(tài)[13][14]。TRACP 5b在血液循環(huán)中被清除之前已無(wú)活性，并被降解為碎片，不會(huì)因肝、腎功能受損而在血液中積蓄。因此，TRACP 5b的檢測(cè)不受肝腎功能的影響。血清TRACP5b是一個(gè)較好的骨吸收監(jiān)測(cè)指標(biāo)[15]。

在病理情況下，包括骨轉(zhuǎn)移時(shí)，由于破骨細(xì)胞活性增加，TRACP 5b分泌也隨之增加，血清TRACP 5b濃度顯著升高[2]。因此，TRACP 5b是一個(gè)反映破骨細(xì)胞功能的指標(biāo)，在眾多乳腺癌骨轉(zhuǎn)移標(biāo)志物中顯示出很高的特異性[16][17]。

I型膠原C端肽(CTX-I)

I型膠原是人體最豐富的膠原蛋白形式，占骨基質(zhì)的90％以上[18]。CTX是I型膠原降解時(shí)的產(chǎn)物的一部分，骨吸收時(shí)釋放入血，部分出現(xiàn)于尿液中。CTX只來(lái)源于成熟I型膠原，而不來(lái)源于新合成膠原，在體內(nèi)不被降解，也不被重新利用，膠原飲食對(duì)測(cè)量結(jié)果無(wú)影響，能直接反映骨膠原纖維的降解情況[19]。

CTX被廣泛認(rèn)為是反映骨吸收的最敏感和最特異的生化指標(biāo)[20]。研究證實(shí)，CTX是研究絕經(jīng)后婦女各種抗骨吸收治療效果觀察及BMD變化評(píng)價(jià)的敏感指標(biāo)[21]，CTX對(duì)于乳腺癌骨轉(zhuǎn)移早期診斷有一定價(jià)值，且濃度水平與骨轉(zhuǎn)移程度密切相關(guān)[22]。在Paget病、原發(fā)性甲旁亢等代謝性疾病中，CTX同樣明顯增加[23]。

骨型堿性磷酸酶(BALP)

堿性磷酸酶(AKP)是一種至少由四組基因編碼的糖蛋白，廣泛分布于人體肝臟、骨骼、腸、腎和胎盤等組織[1]。骨型堿性磷酸酶（BALP）是堿性磷酸酶中的特殊亞型，是成骨細(xì)胞產(chǎn)生的糖蛋白，通過(guò)多糖鏈與磷酸酞肌醇相連。在特異水解酶作用下，BALP被釋放入血[2]。其機(jī)制是水解骨組織微環(huán)境中的無(wú)機(jī)磷酸鹽．降低焦磷酸鹽濃度，維持局部堿性環(huán)境，促進(jìn)骨礦化[3]。

BALP是骨形成的催化劑，是反映全身骨組織形成活動(dòng)的最好指標(biāo)之一[4]。測(cè)定血中BAP可準(zhǔn)確反映骨改變的早期結(jié)果[5]，是成骨細(xì)胞成熟和具有活性的標(biāo)志[6]，是反映骨形成的良好指標(biāo)。BALP是成骨細(xì)胞成熟和具有活性的標(biāo)志，測(cè)定血中BALP的濃度可準(zhǔn)確反映骨改變的早期結(jié)果。在變形性骨炎、骨軟化、原發(fā)性甲狀旁腺功能亢進(jìn)、腎性骨營(yíng)養(yǎng)不良、骨質(zhì)疏松和骨轉(zhuǎn)移中，血清BALP水平的測(cè)定具有重要意義

?氨基端和中段骨鈣素(N-MID OC)

骨鈣素(Osteocalcin)，是骨基質(zhì)中主要的非膠原蛋白質(zhì)，占骨基質(zhì)中非膠原蛋白的25%，占骨總蛋白的2%。骨鈣素由分化成熟的成骨細(xì)胞合成和分泌，大部分沉積于骨基質(zhì)，約20%釋放入血，血清骨鈣素和骨中骨鈣素呈正相關(guān)性，因此血清骨鈣素可以反映骨中骨鈣素的合成狀況[6]。

骨鈣素的主要作用是維持骨正常礦化速率，抑制異常羥基磷灰石的形成，抑制生長(zhǎng)軟骨礦化的速率[7]。血清中骨鈣素水平與骨中骨鈣素水平兩者呈正相關(guān)性，因此血清中骨鈣素濃度可特異性地反映成骨細(xì)胞的活性[8]，用于判斷成骨細(xì)胞活性受抑制的程度。因在骨吸收過(guò)程中基質(zhì)骨鈣素又可釋放于血液，因此，血清骨鈣素水平可作為判斷骨轉(zhuǎn)換狀況的指標(biāo)。

全段骨鈣素在外周血液中自身穩(wěn)定性較差，羧基端43-44間的氨基酸最易被蛋白酶水解，使大多數(shù)多價(jià)抗體不能識(shí)別而不起免疫反應(yīng)，因而全段骨鈣素的測(cè)定值隨樣本放置時(shí)間延長(zhǎng)而下降[9]。檢測(cè)氨基端和中段骨鈣素(N-MID OC)可同時(shí)測(cè)定完整骨鈣素(氨基酸1-49)和裂解后的氨基端-中部片段(氨基酸1-43)，定值較穩(wěn)定。

臨床上廣泛應(yīng)用骨鈣素診斷和監(jiān)測(cè)骨骼疾病、惡性腫瘤、內(nèi)分泌疾病及婦科疾病等[10]。目前的研究表明，血清骨鈣素是敏感、特異地反映機(jī)體成骨功能的重要標(biāo)志物[11]，對(duì)許多代謝性骨疾病的診斷、治療和預(yù)后判斷有一定的意義[12]。

骨膜蛋白(Periostin)

骨組織中骨膜蛋白主要在骨膜中表達(dá),刺激成骨細(xì)胞分化、增殖和黏附,在甲狀旁腺素的骨合成代謝、機(jī)械應(yīng)力調(diào)節(jié)骨重建、骨折修復(fù)、骨的生長(zhǎng)發(fā)育及骨強(qiáng)度維持方面起重要作用。此外,血清骨膜蛋白有望成為一種新的骨代謝生化指標(biāo)。

骨膜蛋白是一種經(jīng)典的分泌性蛋白，在上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化和腫瘤轉(zhuǎn)移中起重要的作用。

骨膜蛋白在多種腫瘤組織中特異性表達(dá),與腫瘤的進(jìn)展及預(yù)后相關(guān),通過(guò)抑制腫瘤細(xì)胞的凋亡,促進(jìn)腫瘤生長(zhǎng)。

美國(guó)華盛頓大學(xué)總院Mikheev AM等在2014年8月《Neuro Oncol》在線發(fā)表對(duì)骨膜蛋白高表達(dá)預(yù)測(cè)膠質(zhì)瘤治療預(yù)后的研究結(jié)果。該項(xiàng)研究首先分析各類膠質(zhì)瘤的骨膜蛋白表達(dá)水平，發(fā)現(xiàn)骨膜蛋白與腫瘤級(jí)別、復(fù)發(fā)以及患者的預(yù)后均相關(guān)。

適用于： 骨組織學(xué), 組織修復(fù), 心血管疾病, 腫瘤, 呼吸道疾病

骨硬化抑素（Sclerostin）:

也稱為硬骨素，骨硬化蛋白， 分子量22.5 kD的分泌糖蛋白，通過(guò)與Wnt-共受體 LRP5的結(jié)合而防止與Wnt 分子的結(jié)合。硬骨素幾乎都是在骨細(xì)胞中產(chǎn)生的。因此認(rèn)為是提供骨特異性MAX高的臨床標(biāo)記物。測(cè)量血清中骨硬化蛋白水平的是研究骨量調(diào)控的一個(gè)新方法，可作為檢測(cè)骨骼疾病和監(jiān)測(cè)的有效工具。Wnt信號(hào)通路及其調(diào)控的骨硬化蛋白的改變，已被證明在與骨代謝異常有關(guān)的骨質(zhì)疏松癥，多發(fā)性骨髓瘤，骨轉(zhuǎn)移和關(guān)節(jié)炎中發(fā)揮著重要的作用。

DKK-1：

DKK-1和骨硬化蛋白是WNT信號(hào)的強(qiáng)抑制劑，在成骨細(xì)胞形成中發(fā)揮重要作用。Dkk-1 在多種腫瘤中因被表觀遺傳修飾而表達(dá)下調(diào)，如人結(jié)直腸癌、胃腸道癌、子宮頸癌、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、乳腺癌和白血病等。然而，在其他許多腫瘤中，Dkk-1顯示出異常高水平的表達(dá)。Dkk-1 的高表達(dá)被證明可以成為多種腫瘤預(yù)后差的標(biāo)志，如肝細(xì)胞癌、食道癌、骨肉瘤、肺癌、卵巢上皮癌、乳腺癌和多發(fā)性骨髓瘤。

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骨保護(hù)素：

由許多不同的組織和細(xì)胞類型（包括成骨細(xì)胞）產(chǎn)生的。 OPG作為RANKL的誘餌受體，是骨吸收的負(fù)調(diào)節(jié)因子，能抵消其促進(jìn)破骨細(xì)胞生產(chǎn)的功能。這種糖蛋白也參與血管鈣化的調(diào)控。骨保護(hù)素在骨降解的調(diào)節(jié)中起著重要的作用, 其在骨質(zhì)疏松及骨腫瘤相關(guān)的疼痛治療中具有較強(qiáng)的潛在作用。多項(xiàng)研究顯示骨保護(hù)素與不同類型的疾病如糖尿病，心力衰竭等引發(fā)未來(lái)心血管風(fēng)險(xiǎn)有顯著相關(guān)。

sRANKL：

可溶性受體活化劑的核因子（NF）-kB的配體（也作：骨保護(hù)素配位體，OPGL）的腫瘤壞死因子（TNF）家族的成員，是主要的刺激因子的成熟破骨細(xì)胞的形成，是他們生存必不可少的物質(zhì)。 RANKL由osteblastic譜系細(xì)胞和活化的T淋巴細(xì)胞產(chǎn)生。它激活其位于破骨細(xì)胞和樹突狀細(xì)胞上的特定受體RANK。由于在正常樣品的可溶性RANKL的血清濃度通常是相當(dāng)?shù)偷?，因此在該ELISA中使用了一個(gè)額外的增強(qiáng)系統(tǒng)。

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成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子（C端）FGF 23 (C-terminal)

FGF-23是一種分泌性蛋白質(zhì)，主要由骨細(xì)胞產(chǎn)生，是磷酸鹽和維生素D代謝的主要調(diào)節(jié)素，其生理功能主要是促進(jìn)尿磷排泄，通過(guò)抑制1α-羥化酶與24-羥基酶，減少血液中維生素D的濃度。

FGF-23過(guò)高可以使磷的重吸收減少，出現(xiàn)低血磷癥，造成佝樓病、骨纖維性結(jié)構(gòu)不良等疾病，而FGF-23水平偏低又造成高血磷癥，引起骨骼畸形、生長(zhǎng)阻滯、壽命縮短等問(wèn)題。