日本協(xié)和1,5-脫水-D-山梨醇檢測試劑盒（酶法）產(chǎn)品說明:

【檢驗原理】

被檢體中的1,5-?脫水-D-山梨醇（1,5-AG）在ADP依存性己糖激酶（ADP-HK）和腺甙?-5’-焦磷酸（ADP）的作用下生成1,5-?脫水山梨醇?-6-磷酸（AG-6-P）。該?AG-6-P?和氧化型β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP+）與?AG-6-?磷酸脫氫酶（AG6P-DH）發(fā)生作用，生成還原型β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸NADPH）。該?NADPH和四唑鹽的2（-?4-碘苯基）-3（-?4-?硝基苯）-5（-?2,4-二磺基苯-2H-?四氮唑鈉鹽（WST-1）與心肌黃酶（DIP）發(fā)生反應，?WST-1?被還原，作為水溶性甲臜色素而發(fā)色。對該甲臜色素的發(fā)色進行比色測量，從而得出?1,5-AG?量。

ADP-HK

1,5-AG+ADP　???????????　AG-6-P+AMP

AG6P-DH

AG-6-P+?NADP+??????????????　?????????C6H11O8P+NADPH+H+

DIP

NADPH+WST-1??????????????????????　NADP++甲臜色素

（λmax?=?438nm）

【主要組成成份】

1．試劑R1

?ADP依存性己糖激酶（ADP-HK）、心肌黃酶（DIP）、腺甙-5’-焦磷酸(ADP）、

氧化型β-?煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP+）

2．試劑R2

?2-(4-碘苯基）-3-（4-硝基苯）-5-（?2,4-?二磺基苯）-2H-?四氮唑鈉鹽(WST-1）、

AG-6-磷酸脫氫酶（AG6P-DH）???

【儲存條件及有效期】

1.??貯藏方法：2-8℃保存（在陰涼處保存，請絕對避免凍結(jié)）；開封后請在2周之內(nèi)使用。

2.??有效期：9個月（有效期見包裝盒及瓶身標簽）

【適用儀器】

該試劑適用于各種全自動生化分析儀，主要有以下四種系列機型：

日立系列（HITACHI）：代表機型是7170。

奧林帕斯（OLYMPUS）：代表機型是AU600。

東芝（TOSHIBA）：代表機型是TBA200FR。

西門子（SIEMENS）：代表機型是JCA-BM1250。

【樣本要求】

1.被檢體可以用血清、血漿的任何一個進行測量。常規(guī)用量范圍內(nèi)的肝素、EDTA、檸檬酸鈉等抗

凝固劑以及氟化鈉，不會對測量造成影響。

2.干擾物

葡萄糖、麥芽糖、半乳糖在常規(guī)濃度下，基本沒有影響。另外，抗壞血酸（50mg/dL）、內(nèi)聚型膽紅素（12mg/dL）、游離型膽紅素（30mg/dL）、溶血紅蛋白（200mg/dL）、乳糜（3000?Formazin濁度）等各物質(zhì)，在被檢體中的濃度在括號中的濃度范圍之內(nèi)的話，基本上不會影響測量。

【檢驗方法】

1．試劑的調(diào)制法

??（1）試劑R-1直接使用，試劑R-1開封后在陰涼處保存（2-8℃），請在2周之內(nèi)使用。

??（2）試劑R-2直接使用，試劑R-2開封后在陰涼處保存（2-8℃），請在2周之內(nèi)使用。

2．必要的物料

??　校準品。請使用校準品中配套的Determiner校準品?1,5‐AG?測定用。

3.?測定法

以使用日立7170S為例（2點終點法）

樣本??????????6μL??????????????????????????????????????測定波長

R-1???????????240?μL???????????R-2???80?μL????????????　??主波長?450nm

????????????????????????????????????????????????????????????副波長?570nm

??????????????????????????????測定??????????????&nbs

該產(chǎn)品用于人體血清或血漿中1，5-脫水-D-山梨醇含量的測定。1,5-脫水-D-山梨醇（1,5-AG是結(jié)構(gòu)類似于葡萄糖的多元醇，主要由食物供給，形成龐大的體內(nèi)池。并且，由于1,5-AG是與葡萄糖相類似的結(jié)構(gòu)，由于高血糖作帶來的葡萄糖排泄（尿糖），再吸收受到了競爭阻礙，流失到尿液中，降低了血中濃度。此時，體內(nèi)池也開始減少。隨著血糖控制的改善，可以正常地接受來自食物的供應，恢復到了個人的正常值。1,5-AG是能夠非常敏銳地反映血糖的控制狀況的血糖綜合指標。在預計血糖變動很激烈的情況下，每隔幾日進行一次測量也可以反映出其變動。特別是對于把握輕度糖尿病患者的血糖變化非常有效。