日本協(xié)和1,5-脫水-D-山梨醇檢測(cè)試劑盒（酶法）產(chǎn)品說(shuō)明:

【檢驗(yàn)原理】

被檢體中的1,5-?脫水-D-山梨醇（1,5-AG）在ADP依存性己糖激酶（ADP-HK）和腺甙?-5’-焦磷酸（ADP）的作用下生成1,5-?脫水山梨醇?-6-磷酸（AG-6-P）。該?AG-6-P?和氧化型β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP+）與?AG-6-?磷酸脫氫酶（AG6P-DH）發(fā)生作用，生成還原型β-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸NADPH）。該?NADPH和四唑鹽的2（-?4-碘苯基）-3（-?4-?硝基苯）-5（-?2,4-二磺基苯-2H-?四氮唑鈉鹽（WST-1）與心肌黃酶（DIP）發(fā)生反應(yīng)，?WST-1?被還原，作為水溶性甲臜色素而發(fā)色。對(duì)該甲臜色素的發(fā)色進(jìn)行比色測(cè)量，從而得出?1,5-AG?量。

ADP-HK

1,5-AG+ADP　???????????　AG-6-P+AMP

AG6P-DH

AG-6-P+?NADP+??????????????　?????????C6H11O8P+NADPH+H+

DIP

NADPH+WST-1??????????????????????　NADP++甲臜色素

（λmax?=?438nm）

【主要組成成份】

1．試劑R1

?ADP依存性己糖激酶（ADP-HK）、心肌黃酶（DIP）、腺甙-5’-焦磷酸(ADP）、

氧化型β-?煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（NADP+）

2．試劑R2

?2-(4-碘苯基）-3-（4-硝基苯）-5-（?2,4-?二磺基苯）-2H-?四氮唑鈉鹽(WST-1）、

AG-6-磷酸脫氫酶（AG6P-DH）???

【儲(chǔ)存條件及有效期】

1.??貯藏方法：2-8℃保存（在陰涼處保存，請(qǐng)絕對(duì)避免凍結(jié)）；開(kāi)封后請(qǐng)?jiān)?周之內(nèi)使用。

2.??有效期：9個(gè)月（有效期見(jiàn)包裝盒及瓶身標(biāo)簽）

【適用儀器】

該試劑適用于各種全自動(dòng)生化分析儀，主要有以下四種系列機(jī)型：

日立系列（HITACHI）：代表機(jī)型是7170。

奧林帕斯（OLYMPUS）：代表機(jī)型是AU600。

東芝（TOSHIBA）：代表機(jī)型是TBA200FR。

西門(mén)子（SIEMENS）：代表機(jī)型是JCA-BM1250。

【樣本要求】

1.被檢體可以用血清、血漿的任何一個(gè)進(jìn)行測(cè)量。常規(guī)用量范圍內(nèi)的肝素、EDTA、檸檬酸鈉等抗

凝固劑以及氟化鈉，不會(huì)對(duì)測(cè)量造成影響。

2.干擾物

葡萄糖、麥芽糖、半乳糖在常規(guī)濃度下，基本沒(méi)有影響。另外，抗壞血酸（50mg/dL）、內(nèi)聚型膽紅素（12mg/dL）、游離型膽紅素（30mg/dL）、溶血紅蛋白（200mg/dL）、乳糜（3000?Formazin濁度）等各物質(zhì)，在被檢體中的濃度在括號(hào)中的濃度范圍之內(nèi)的話，基本上不會(huì)影響測(cè)量。

【檢驗(yàn)方法】

1．試劑的調(diào)制法

??（1）試劑R-1直接使用，試劑R-1開(kāi)封后在陰涼處保存（2-8℃），請(qǐng)?jiān)?周之內(nèi)使用。

??（2）試劑R-2直接使用，試劑R-2開(kāi)封后在陰涼處保存（2-8℃），請(qǐng)?jiān)?周之內(nèi)使用。

2．必要的物料

??　校準(zhǔn)品。請(qǐng)使用校準(zhǔn)品中配套的Determiner校準(zhǔn)品?1,5‐AG?測(cè)定用。

3.?測(cè)定法

以使用日立7170S為例（2點(diǎn)終點(diǎn)法）

樣本??????????6μL??????????????????????????????????????測(cè)定波長(zhǎng)

R-1???????????240?μL???????????R-2???80?μL????????????　??主波長(zhǎng)?450nm

????????????????????????????????????????????????????????????副波長(zhǎng)?570nm

??????????????????????????????測(cè)定??????????????&nbs

該產(chǎn)品用于人體血清或血漿中1，5-脫水-D-山梨醇含量的測(cè)定。1,5-脫水-D-山梨醇（1,5-AG是結(jié)構(gòu)類(lèi)似于葡萄糖的多元醇，主要由食物供給，形成龐大的體內(nèi)池。并且，由于1,5-AG是與葡萄糖相類(lèi)似的結(jié)構(gòu)，由于高血糖作帶來(lái)的葡萄糖排泄（尿糖），再吸收受到了競(jìng)爭(zhēng)阻礙，流失到尿液中，降低了血中濃度。此時(shí)，體內(nèi)池也開(kāi)始減少。隨著血糖控制的改善，可以正常地接受來(lái)自食物的供應(yīng)，恢復(fù)到了個(gè)人的正常值。1,5-AG是能夠非常敏銳地反映血糖的控制狀況的血糖綜合指標(biāo)。在預(yù)計(jì)血糖變動(dòng)很激烈的情況下，每隔幾日進(jìn)行一次測(cè)量也可以反映出其變動(dòng)。特別是對(duì)于把握輕度糖尿病患者的血糖變化非常有效。