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2主要參數(shù)設置的技巧
2.1方法類型可根據(jù)試劑盒要求或反應原理來設置。對于半自動生化分析儀終點法只是一點終點法,全自動生化儀單試劑選擇一點終點法,而雙試劑選擇兩點終點法。大多數(shù)酶學測定使用速率法,尿素氮、肌酐測定等用兩點法。
2.2生化儀超純水設備技術測定波長選擇有三個主要條件:
(1)待測物質在該波長下的光吸收最大。
(2)其吸收峰宜較寬而鈍。
(3)常見干擾物在該波長下的光吸收最小。試劑盒說明一般已提供波長參數(shù)。有些儀器波長選擇受濾光片數(shù)量限制,應該就近選擇為原則。
2.3測定溫度一般全自動生化儀都是37℃,而半自動生化儀有室溫、25~C、30cc、37~C等,終點法由于反應在機外進行,選擇室溫可以減少儀器溫度調整時間,提高工作效率,而速率法和兩點法都選擇37℃比較合適。
2.4吸液量主要是針對流動比色的全自動或半自動儀器的參數(shù),原則是吸人量不得大于或等于反應液總體積,否則會導致吸空形成比色池氣泡,最好留100~200ul的余地。
2.5標準液濃度終點法和兩點法必須設置標準,選擇合格的標準品很重要。有些試劑盒配有標準液,但是部分項目標準液定標偏差太大,我們使用的是干粉復合羅氏校準液,復溶后分裝冷凍保存,只要復溶的水質保證,避免反復凍融,校準的結果還是很滿意的。注意校準液靶值獲得的方法學,方法不同耙值是有差異的,比較典型的是ALP測定有IFCC和DGKC法,差異比較大,不可簡單套用。2.9 K值速率法測定無需帶標準或做標準曲線,首先確定樣本量和工作試劑量,再根據(jù)被測物質的摩爾消光系數(shù),就可按速率法計算公式計算出因素K值了。K=TV×10。/(8×SV XL),TV為反應液總體積,sV為樣本體積,L為比色杯光徑(em),£為毫摩爾消光系數(shù)。
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